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17-羟孕酮(17-OHP)检测试剂盒

货号: YPJ1678
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产品介绍

反应种属
通用种属
检测范围
246.9-20,000pg/mL
灵敏度
物理性能
各液体组分澄清透明、无沉淀或者絮状物。微孔板铝箔袋 应真空包装,无破损漏气。
用途
用于检测血清、血浆、细胞培养上清液等样本中17-羟孕酮(17-OHP)的浓度。
实验原理
试剂盒采用酶联免疫分析方法。采用生物素标记17-羟孕酮(17-OHP),纯化的抗17-羟孕酮(17-OHP)抗体包被微孔板,在竞争抑制反应中,一定量的固相抗体与生物素标记17-羟孕酮(17-OHP)及非标记抗原(校准品或标本)进行抑制竞争反应,抗体与生物素标记的17-羟孕酮(17-OHP)结合量受非标记抗原量所抑制,非标记抗原量多,抗体与生物素标记的17-羟孕酮(17-OHP)结合就少,反之结合就多;反应平衡后,形成固相抗体-生物素化17-羟孕酮(17-OHP),再加入酶标记的亲和素,形成固相抗体-生物素化17-羟孕酮(17-OHP)-酶标-亲合素复合物。经加底物显色后,用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值)。随着17-羟孕酮(17-OHP)浓度的升高,OD值逐渐下降呈良好的线性关系。本试剂盒具有灵敏度高、特异性强、重复性好、操作简单、快速等特点,对样本中17-羟孕酮(17-OHP)的减少或升高有可靠的检出性能。
特异性
本试剂盒识别天然和重组17-羟孕酮(17-OHP),与结构类似物无交叉。
重复性
板内,板间变异系数均<10%。
回收率
回收率在 85%-115%之间。
试验所需自备试验器材
1、标准规格酶标仪。 2、自动洗板机。 3、振荡器。 4、系列可调节移液器及吸头,一次检测样品较多时,最好用多通道移液器。
操作程序
温平衡半小时,取浓缩洗涤液,根据当批检测数量,用蒸馏水1:20稀释,混匀后备用。 2.将预包被板从密封袋中取出,设一个空白对照孔,不加任何液体;每个校准品设2孔,每孔加入对应校准品50μl;其余每个检测孔直接加待测血清或质控品50μl。 3.除空白孔外所有孔加入生物素化抗原50μl,混匀,贴上封板膜,置37℃温育60分钟。 4.手工洗板:弃去孔内液体,洗涤液注满各孔,静置10秒甩干,重复3次后拍干。洗板机洗板:选择洗涤3次程序洗板后拍干。 5.每孔加入酶标亲和素50μl(空白对照孔除外),混匀,贴上封板膜,置37℃温育30分钟。 6.手工洗板:弃去孔内液体,洗涤液注满各孔,静置10秒甩干,重复3次后拍干。洗板机洗板:选择洗涤3次程序洗板后拍干。 7.每孔加显色剂A 50μl,显色剂B 50μl,振荡混匀后,置37℃避光显色15分钟,每孔加终止液50μl。 8.用酶标仪读数,取波长450nm,先用空白对照孔调零点,然后测定各孔光密度值(OD值)。
注意事项
1、本试剂盒仅供体外研究使用,不用于临床诊断。 2、试验中请穿着实验服并戴乳胶手套做好防护工作。特别是检测血液或者其他体液样品时,请按国家生物试验室安全防护条例执行。 3、严格按照规定的时间和温度进行温育以保证准确结果。所有试剂都必须在使用前达到室温 20-25℃。使用后立即冷藏保存试剂。 4、洗板不正确可能导致不准确的结果。在加入底物前确保尽量吸干孔内液体。温育过程中不要让微孔干燥掉。 5、消除板底残留的液体和手指印,否则影响 OD 值。 6、底物显色液应呈无色或很浅的颜色。 7、避免试剂和标本的交叉污染以免造成错误结果。 8、在储存和温育时避免强光直接照射。 9、平衡至室温后再打开密封袋以防水滴凝聚在冷板条上。 10、任何反应试剂不能接触漂白溶剂或漂白溶剂所散发的强烈气体。任何漂白成分都会破坏试剂盒中反应试剂的生物活性。 11、检测使用的酶标仪需要安装能检测 450±10nm 波长的滤光片,光密度范围在0-3.5 之间。建议使用时提前 15 分钟预热。 12、请勿使用其他批号或其他来源的试剂混合或替代本试剂盒中的试剂。 13、试验中所用的 EP 管和吸头均为一次性使用,严禁混用。 14、请勿使用过期的试剂。
问题分析
①问题描述:阴阳性对照结果不稳定 可能原因及相应对策: 1.吸液或加液不准——检查移液器及吸头 2.平衡时间太短——保证充足的平衡时间 3.洗涤不完全——保证洗涤时间和洗涤次数及每孔的加液量 ②问题描述:显色很弱或无色 可能原因及相应对策: 1.孵育时间太短——保证充足的孵育时间 2.实验温度不正确——使用推荐的实验温度 3.试剂体积不够或漏加/稀释不正确——检查吸液及加液过程,保证所有试剂按顺序足量添加 4.酶标记物失活或底物失效——混合酶结合物和底物,通过迅速显色来检查判断 ③问题描述:读数数值低 可能原因及相应对策: 1.酶标仪设置不正确——在酶标仪上检查波长及滤光片设置/提前打开酶标仪预热 ④问题描述:变异系数大 可能原因及相应对策: 1.加液不正确——检查加液情况 ⑤问题描述:背景值高 可能原因及相应对策: 1.检测抗体的工作浓度过高——使用推荐的稀释倍数 2.酶标板洗涤不完全——保证每步清洗完全;如果用自动洗板机,请检查所有的出口是否有堵塞;是否使用试剂盒配备的洗涤液 3.洗液有污染——配制新的洗液 ⑥问题描述:灵敏度低 可能原因及相应对策: 1.ELISA试剂盒保存不当——按说明书要求保存相关试剂 2.读数前未终止——OD读数前应在每孔中加入终止液
声明
1、限于现有条件及科学技术水平,尚不能对所有原料进行全面的鉴定分析,本产品可能存在一定的质量技术风险。 2、本试剂盒在研发过程中去除/降低了生物学样本中的一些内源性干扰因素,并非所有可能影响的因素均已去除。 3、最终的实验结果与试剂的有效性、实验者的相关操作以及当时的实验环境等因素密切相关,本公司只对试剂盒本身负责,不对因使用试剂盒所造成的样本消耗负责,请使用者使用前充分考虑到样本可能的使用量,预留充足的样本。 4、为了达到好的实验结果,请只使用本公司试剂盒内提供的试剂,不要混用其他制造商的产品,严格按照说明书操作。 5、由于操作过程中试剂制备以及酶标仪参数设置不正确,可能导致结果异常,实验前请仔细阅读说明书并调整好仪器。 6、即使是相同人员操作也可能在两次独立实验中得到不同的结果,为保证结果的重现性,需要控制实验过程中每一步的操作。 7、试剂盒发货前会经过严格的质检,然而,因为运输条件、实验设备差异等等因素影响,用户检测结果可能跟出厂数据不一致。 8、本试剂盒未与其他厂家同类试剂盒或不同方法检测同一目的物的产品进行对比,所以不排除检测结果不一致的情况。 9、试剂盒仅供研究使用,如将其用于临床诊断或任何其他用途,我公司将不对因此产生的问题负责,亦不承担任何法律责任。

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