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生化常见问题及解答

1.如何选择代谢测定试剂盒?

客户根据自己的实验方案确定需要检测的指标及样本类型,若同一个指标对应多个试剂盒,则根据实验室的仪器(荧光酶标仪,酶标仪,分光光度计)来选择合适的产品,并根据样本数量来计算需要购买的产品数量。

2.一个指标涉及到多种检测方法时,如何选择?

1)检测原理。
2)灵敏度及线性范围。
3)操作简便性。
4)试剂盒的性价比。
5)试剂盒是否现货。

 

3.代谢测定试剂盒可以检测的样本类型有哪些?

代谢测定试剂盒的实验原理是基于化学反应,理论上是不受生物种属及样本类型的限制。UpingBio代谢测定试剂盒样本检测通常只分样本类型,不分种属。但是某些指标在不同种属或类型样本中的提取方式不同。因此,具体情况请参见说明书或与技术支持联系确认。

 

3.代谢测定试剂盒可以检测的样本类型有哪些?

代谢测定试剂盒的实验原理是基于化学反应,理论上是不受生物种属及样本类型的限制。UpingBio代谢测定试剂盒样本检测通常只分样本类型,不分种属。但是某些指标在不同种属或类型样本中的提取方式不同。因此,具体情况请参见说明书或与技术支持联系确认。

 

5.可测样本数怎么理解?为什么96T只能做40样?

说明书上的可测样本数是指不做复孔的情况下样本的检测数量;96T指能做96次测定,40样指可以做40个样本(每个样本包括一个测定孔和一个对照孔),另外16次测定用于做标曲。如果每个样本设置1个复孔,则可测样本数要减半。为了保证实验结果的准确性,我们建议样本做复孔检测。当然,代谢测定并非要求一定做复孔/3复孔,客户可根据自己的需求设定实验的复孔与否。

UpingBio代谢测定试剂盒每个货号对应的产品规格,以及可测样本数都是不太一样的,具体可测多少样,参考说明书或咨询技术支持。

96 T的酶标仪检测试剂盒规格为例:
① 96T/92样:96次测定,可以做92个样本,剩余4次测定用于空白和对照孔;
② 96T/80样:96次测定,可以做80个样本,剩余16次测定用于做标曲;
③ 96T/46样:96次测定,可以做46个样本(每个样本包括一个测定和一个对照孔),剩余4次测定用于空白或对照孔;
④ 96T/40样:96次测定,可以做40个样本(每个样本包括一个测定和一个对照孔),剩余16次测定用于做标曲。

 

5.可测样本数怎么理解?为什么96T只能做40样?

说明书上的可测样本数是指不做复孔的情况下样本的检测数量;96T指能做96次测定,40样指可以做40个样本(每个样本包括一个测定孔和一个对照孔),另外16次测定用于做标曲。如果每个样本设置1个复孔,则可测样本数要减半。为了保证实验结果的准确性,我们建议样本做复孔检测。当然,代谢测定并非要求一定做复孔/3复孔,客户可根据自己的需求设定实验的复孔与否。
UpingBio代谢测定试剂盒每个货号对应的产品规格,以及可测样本数都是不太一样的,具体可测多少样,参考说明书或咨询技术支持。

96 T的酶标仪检测试剂盒规格为例:
① 96T/92样:96次测定,可以做92个样本,剩余4次测定用于空白和对照孔;
② 96T/80样:96次测定,可以做80个样本,剩余16次测定用于做标曲;
③ 96T/46样:96次测定,可以做46个样本(每个样本包括一个测定和一个对照孔),剩余4次测定用于空白或对照孔;
④ 96T/40样:96次测定,可以做40个样本(每个样本包括一个测定和一个对照孔),剩余16次测定用于做标曲。

 

5.可测样本数怎么理解?为什么96T只能做40样?

说明书上的可测样本数是指不做复孔的情况下样本的检测数量;96T指能做96次测定,40样指可以做40个样本(每个样本包括一个测定孔和一个对照孔),另外16次测定用于做标曲。如果每个样本设置1个复孔,则可测样本数要减半。为了保证实验结果的准确性,我们建议样本做复孔检测。当然,代谢测定并非要求一定做复孔/3复孔,客户可根据自己的需求设定实验的复孔与否。

UpingBio代谢测定试剂盒每个货号对应的产品规格,以及可测样本数都是不太一样的,具体可测多少样,参考说明书或咨询技术支持。

96 T的酶标仪检测试剂盒规格为例:
① 96T/92样:96次测定,可以做92个样本,剩余4次测定用于空白和对照孔;
② 96T/80样:96次测定,可以做80个样本,剩余16次测定用于做标曲;
③ 96T/46样:96次测定,可以做46个样本(每个样本包括一个测定和一个对照孔),剩余4次测定用于空白或对照孔;
④ 96T/40样:96次测定,可以做40个样本(每个样本包括一个测定和一个对照孔),剩余16次测定用于做标曲。

 

5.可测样本数怎么理解?为什么96T只能做40样?

说明书上的可测样本数是指不做复孔的情况下样本的检测数量;96T指能做96次测定,40样指可以做40个样本(每个样本包括一个测定孔和一个对照孔),另外16次测定用于做标曲。如果每个样本设置1个复孔,则可测样本数要减半。为了保证实验结果的准确性,我们建议样本做复孔检测。当然,代谢测定并非要求一定做复孔/3复孔,客户可根据自己的需求设定实验的复孔与否。

UpingBio代谢测定试剂盒每个货号对应的产品规格,以及可测样本数都是不太一样的,具体可测多少样,参考说明书或咨询技术支持。

96 T的酶标仪检测试剂盒规格为例:
① 96T/92样:96次测定,可以做92个样本,剩余4次测定用于空白和对照孔;
② 96T/80样:96次测定,可以做80个样本,剩余16次测定用于做标曲;
③ 96T/46样:96次测定,可以做46个样本(每个样本包括一个测定和一个对照孔),剩余4次测定用于空白或对照孔;
④ 96T/40样:96次测定,可以做40个样本(每个样本包括一个测定和一个对照孔),剩余16次测定用于做标曲。

 

9.如何进行预实验?为什么要进行预实验?

1)在正式检测前,选择差异较大的2-3个样本,进行不同浓度的样本稀释,然后按照说明书上的实验操作步骤进行预实验,根据预实验的结果,再结合试剂盒的检测范围来确定样本的最佳稀释倍数。
2)预实验的目的是:
① 确定该试剂盒是否适合您的样本检测,以免造成试剂盒和样本的浪费;
② 帮助您熟悉代谢测定试剂盒的操作流程,尤其是初次使用代谢测定试剂盒的客户;
③ 确定样本的处理方法及稀释倍数是否适合该试剂盒的测定;
④ 帮助你了解实验过程中可能出现的实验现象或者是问题,好及时作出调整;

 

10.试剂盒中有要求需要做标曲的,能否不做标曲直接采用说明书上的?不会做标曲,标曲不过原点怎么办?

1)UpingBio代谢测定试剂盒一般用酶标仪检测的产品大多数都是要求客户自己做标曲的。怎么判断要不要做标曲,可以看说明书上的酶标版设置、操作表或计算公式部分。需要做标曲的产品,客户不可以不做(直接采用说明书上的标曲计算),因为实验室的环境、仪器设备、实验人员、操作手法都不一样。
2)不会做标曲,可以直接联系公司技术人员寻求帮助。所做的标曲跟说明书上的不太一样,标曲不过原点,主要是在做标曲时,没有用浓度与绝对OD值作图导致的。绝对OD值是用不同浓度标准品的OD值减去浓度为0的标准品OD值。

 

11.为什么同一样本平行测定结果差异大(复孔差异大)?

1)样本原因:样本体系不均匀、样本提取时离心不完全、杂质等原因。
2)仪器原因:仪器不稳定造成系统误差大,一般仪器需要预热30分钟后再进行比色检测。
3)操作原因:由于操作不熟练,加样和加液手法问题,造成平行结果差异大。

 

11.为什么同一样本平行测定结果差异大(复孔差异大)?

1)样本原因:样本体系不均匀、样本提取时离心不完全、杂质等原因。
2)仪器原因:仪器不稳定造成系统误差大,一般仪器需要预热30分钟后再进行比色检测。
3)操作原因:由于操作不熟练,加样和加液手法问题,造成平行结果差异大。

 

13.测定管与对照管或者空白管为什么会没有差异,甚至低于对照管或空白管?

1)如果空白值偏高,可能是空白管存在一定的污染。
2)样本原因导致测定与对照或空白结果几乎没有差异:
① 样本本身的指标含量偏低导致的,可以考虑适当增加样本量或者提高样本浓度;
② 样本提取是否正确和充分,提取步骤是否按照说明书操作步骤进行。如果样本提取不充分或者未按说明书要求操作,也可能会导致结果偏低的情况。
③ 样品保存不当导致的。需要客户自己仔细检查样本处理、保存以及制备状况。

 

14.数据变化趋势不符合预期?

通常客户在实验前,会根据参考文献或此前实验室的相关测定结果,对实验结果有一个预估变化趋势。但是,实际测定的数据变化有时却并不符合预期。
① 先查找实验技术问题,以及计算公式和单位有没有问题;
② 再找样本质量有没有问题;
③ 若两者都没有问题,我们就要思考实验方案,有时不符合预期的结果反而意味着研究的新意,甚至是新发现。
④ 如果选择了测定系列指标,就可以通过相关指标的变化趋势是否一致,来判断该指标的变化是否正常,因为同时几个相关指标变化都不正常的可能性比较小。

 

15.为什么检测数据与文献报道或者实验室此前测定数据结果差异大?

1)样品本身的影响:同一指标在不同样品,同一样品不同发育阶段或者不同环境下,其浓度或酶活会发生非常大的变化。
2)测定方法的影响:同一指标因为测定方法不同,检测结果会出现较大的差异,与文献对比时,应注意文献的检测方法、培养和处理条件及计算公式、单位、单位的定义等。
3)操作和仪器设备的影响:操作者取样习惯、匀浆程度和外部检测环境等都会对检测结果有很大影响。不同仪器设备的检测限和稳定性也会有一定影响。
4)与其他文献检测结果比较时,应比较实验组与对照组的数据差异性和变化趋势,而不是检测结果的数值。