发布时间:2024-12-19
优品生物研发生产的ELISA试剂盒
凭借其特异性强、回收率好、灵敏度高等优点
赢得了众多客户的青睐与好评
今天推荐的明星系列产品——
抗卵清蛋白(OVA)ELISA试剂盒
主打一个“一盒在手,实验无忧”
让你的ELISA实验更加得心应手
近年来,全球哮喘患病率以每 10 年 20%~50% 的比例增长,我国成年人哮喘患病率为1.09%。哮喘严重威胁人类健康,给患者及其家庭和社会带来沉重的负担,因此借助哮喘动物模型对于支气管哮喘病因、发病机制及治疗方面的研究很有必要,而用于模拟人类支气管哮喘的动物种类中以小鼠哮喘模型居多。
卵清蛋白(ovalbumin,OVA)是目前使用最广泛的致敏原,常与非免疫原性佐剂联合使用。当致敏原卵清蛋白注入小鼠体内,其可溶性抗原成分刺激机体产生IgE,使机体处于致敏状态。当小鼠再次接触到此抗原时,由IgE介导发生抗原抗体反应,使细胞脱颗粒,释放出活性化学物质如组胺、嗜酸性粒细胞趋化因子等,作用于支气管引起气道高反应导致哮喘。
另外,IgG是血清中免疫球蛋白中含量最高的二次免疫应答主要抗体。占据三分之二IgG的是具有γ1的H链,分子量146 kDa的IgG1。以OVA(卵清蛋白)作为特殊化抗原,通过测定抗OVA- IgG1抗体值可以用来阐明小鼠免疫系统作用机理。
小鼠哮喘模型:
BALB/c小鼠,6~8周龄,雌性,体重20~25g,随机分为4组。分别将0、10、100、1000μg剂量的鸡卵蛋白(OVA, Grade V, Sigma)加40mg氢氧化铝溶于pH7.4的PBS 0.2ml中,于第0、7、14d分别给4组小鼠腹腔内注射。
第15~20d为雾化激发阶段,将小鼠放入雾化吸入箱,通过雾化发生器雾化吸入5%OVA生理盐水液,每天1次,每次20min,共6d,小鼠出现烦躁不安、呼吸急促、腹肌痉挛、两便失禁为阳性反应。雾化动力由5L/min的压缩空气提供。
在最后一次激发24h后眼球取血,处死动物,血标本4℃1800转/分离心15min,血清分装后-20℃保存。OVA特异性抗体IgE、IgG2a的测定使用ELISA检测试剂盒。
(此为简单的演示配图,具体动物选择以实际实验需求为准)
在众多的小鼠研究中可以得到验证,即过敏性哮喘是2型T辅助细胞驱动的炎性疾病,Th2细胞因子有着不可忽视的重要性。具体来说,Th2淋巴细胞可以产生各种促炎性细胞因子,这些因子在过敏性哮喘的发展中具有重要作用,包括白介素(IL)-4,IL-5和IL-13。此外,它们还可以诱导过敏原特异性免疫球蛋白lgE,趋化因子和嗜酸性粒细胞的分泌以及粘液的产生。
优品生物,专业的第三方科研检测中心,致力于科研试剂的研发、生产和销售,助力哮喘炎症机制更全面、更深入地探索和研究,我们拥有该指标的明星系列试剂盒小鼠抗卵清蛋白(OVA)ELISA试剂盒,今天主要说说其中一款热门指标产品——小鼠抗卵清蛋白IgG抗体(OVAIgG)检测试剂盒。
小鼠抗卵清蛋白IgG抗体(OVAIgG)检测试剂盒,采用间接法定量检测血清、血浆、组织匀浆及相关液体样本中小鼠抗卵清蛋白IgG抗体(OVAIgG)的含量。采用高亲和力抗体,具有特异性强,灵敏度高(pg级),线性范围广,抗原预包被,操作简单便捷等优势。
(血清、血浆样本操作步骤)这个图是双抗夹心的,要放间接法的
试剂盒好不好,抗原抗体原料很重要,抗原的性能是决定间接法免疫检测试剂性能的决定性因素。接下来,我们针对优品生物的小鼠抗OVA IgG抗体进行一个对比测试,来验证抗体的品质。
1、按照右图测IgG1等6个指标,B5孔没有样品(B1代替)
2、提供酶标仪照片
血清样本分四组,每组五个血清样品,分别为:
A1、A2、A3、A4、A5
B1、B2、B3、B4、B5
C1、C2、C3、C4、C5
D1、D2、D3、D4、D5
间接法:包被抗原板,加入待测样本/标曲,加入相对应的HRP偶联的二抗,形成抗原-抗体-二抗复合物;最后通过HRP催化底物显色,发生颜色反应,颜色的深浅代表抗原抗体反应强度。
预包被抗原板后,按照如下设计进行加样:
小鼠抗卵清蛋白(OVA)IgG2a:
小鼠抗卵清蛋白(OVA)IgG1:
实验步骤:两步法
(1)按设计图,在板上加入50µL标准品,37℃孵育30min;
(2)洗板5次 ,再加入100µL检测抗体(HRP),37℃孵育30min;
(2)洗板5次,加底物A、B各50µL,37度孵育15min;
(3)加入50µL终止液,读数。
1.预实验实验结果:
小鼠抗卵清蛋白(OVA)IgG2a:
结论:样本A2和B3样本不显色,C4和D5的10倍显色居中。
小鼠抗卵清蛋白(OVA)IgG1:
结论:0值正常,线性良好,A5不显色,B4还需继续稀释,C3和D2稀释1000倍显色居中。
2.正式实验结果:
小鼠抗卵清蛋白(OVA)IgG2a:
结论:样本A1,A2和B5没有样本量,样本C4,D1和D5显色居中,其余样本不显色。
小鼠抗卵清蛋白(OVA)IgG1:
结论:0值正常,线性良好,样本A1,A2和B5无样本量,样本A3,A5,B1-B4,C1,C3,C5,D1-D4显色居中。
从以上的测试验证可以看出,优品生物的抗体特异性、灵敏度、稳定性等指标有着非常优异的效果,品质不输大牌进口,处于行业领先地位。接下来来看看小鼠抗卵清蛋白IgG抗体(OVAIgG)ELISA试剂盒的实验数据。
1. 检测范围:0.25 ng/mL – 8 ng/mL。
2. 灵敏度:最低检测浓度小于0.09 ng/mL。
3. 特异性:不与其它可溶性结构类似物交叉反应。
4. 稳定性:2-8℃保存,有效期6个月。
以所测标准品的OD值为横坐标,标准品的浓度值为纵坐标,用相关软件创建标准曲线方程,最佳方程式应依方程计算的R2值来定,将样品的OD值代入方程,计算出样品的浓度。
板内精密度:低浓度样本,中浓度样本和高浓度样本分别在1块板子上检测20次。
板间精密度:低浓度样本,中浓度样本和高浓度样本分别在3块板子上检测20次。
可见优品生物试剂盒产品的板内和板间精密度均非常好。
分别往不同样本中添加已知浓度的OVA IgE,做回收实验,得出回收率范围和平均回收率。可见优品生物试剂盒产品的回收率(准确度)好。
将添加有OVA IgE的样本分别稀释2倍,4倍,8倍,16倍做回收实验,得出回收率范围及平均回收率。可见优品生物试剂盒产品的稀释线性(稀释回收率)好。
优品生物,在高质量循证医学研究的支持下,哮喘的诊断和治疗必定将不断完善,为更多哮喘患者带来获益。
以下是优品生物与卵清蛋白(OVA)有关的试剂盒产品: