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明星产品|小鼠抗卵清蛋白(OVA)ELISA试剂盒

发布时间:2024-12-19

优品生物研发生产ELISA试剂盒

凭借其异性强、回收率好、灵敏度高等优点

赢得了众多客户的青睐与好评

今天推荐的明星系列产品——

抗卵清蛋白(OVAELISA试剂盒

主打一个“一盒在手,实验无忧”

让你的ELISA实验更加得心应手

近年来,全球哮喘患病率以每 10 20%~50% 的比例增长,我国成年人哮喘患病率为1.09%。哮喘严重威胁人类健康,给患者及其家庭和社会带来沉重的负担因此借助哮喘动物模型对于支气管哮喘病因、发病机制及治疗方面的研究很有必要用于模拟人类支气管哮喘的动物种类中以小鼠哮喘模型居多。

 

卵清蛋白ovalbumin,OVA是目前使用最广泛的致敏原常与非免疫原性佐剂联合使用。当致敏卵清蛋白注入小鼠体内,其可溶性抗原成分刺激机体产生IgE,使机体处于致敏状态。当小鼠再次接触到此抗原时,由IgE介导发生抗原抗体反应,使细胞脱颗粒,释放出活性化学物质如组胺、嗜酸性粒细胞趋化因子等,作用于支气管引起气道高反应导致哮喘。

 

另外,IgG是血清中免疫球蛋白中含量最高的二次免疫应答主要抗体。占据三分之二IgG的是具有γ1H链,分子量146 kDaIgG1。以OVA(卵清蛋白)作为特殊化抗原,通过测定抗OVA- IgG1抗体值可以用来阐明小鼠免疫系统作用机理。

 

小鼠哮喘模型

BALB/c小鼠,6~8周龄,雌性,体重20~25g,随机分为4组。分别将0、10、100、1000μg剂量的鸡卵蛋白(OVA, Grade V,  Sigma)加40mg氢氧化铝溶于pH7.4的PBS 0.2ml中,于第0、7、14d分别给4组小鼠腹腔内注射。

 

15~20d为雾化激发阶段,将小鼠放入雾化吸入箱,通过雾化发生器雾化吸入5%OVA生理盐水液,每天1次,每次20min,共6d,小鼠出现烦躁不安、呼吸急促、腹肌痉挛、两便失禁为阳性反应。雾化动力由5L/min的压缩空气提供。

 

在最后一次激发24h后眼球取血,处死动物,血标本4℃1800转/分离心15min,血清分装后-20℃保存。OVA特异性抗体IgE、IgG2a的测定使用ELISA检测试剂盒。

简单的演示配图,具体动物选择以实际实验需求为准

 

在众多小鼠研究中可以得到验证过敏性哮喘是2T辅助细胞驱动的炎性疾病Th2细胞因子有着不可忽视的重要性。具体来说,Th2淋巴细胞可以产生各种促炎性细胞因子,这些因子在过敏性哮喘的发展中具有重要作用,包括白介素(IL)-4IL-5IL-13此外,它们还可以诱导过敏原特异性免疫球蛋白lgE,趋化因子和嗜酸性粒细胞的分泌以及粘液的产生。

优品生物,专业的第三方科研检测中心,致力于科研试剂的研发、生产和销售助力哮喘炎症机制更全面、更深入地探索和研究,我们拥有该指标的明星系列试剂盒小鼠抗卵清蛋白(OVAELISA试剂盒,今天主要说说其中一款热门指标产品——小鼠抗卵清蛋白IgG抗体(OVAIgG)检测试剂盒。

 

小鼠抗卵清蛋白IgG抗体(OVAIgG)检测试剂盒,采用间接定量检测血清、血浆、组织匀浆及相关液体样本中小鼠抗卵清蛋白IgG抗体(OVAIgG的含量采用高亲和力抗体,具有特异性强,灵敏度高(pg级),线性范围广,抗预包被,操作简单便捷等优势。

(血清、血浆样本操作步骤)这个图是双抗夹心的,要放间接法的

 

试剂盒好不好,抗原抗体原料很重要,抗原的性能是决定间接法免疫检测试剂性能的决定性因素。接下来,我们针对优品生物的小鼠抗OVA IgG抗体进行一个对比测试来验证抗体的品质。


小鼠抗卵清蛋白lgG2a抗体(OVA IgG2a)  

小鼠抗卵清蛋白lgG1抗体(OVA lgG1) 检测试剂盒

一、实验要求

1、按照右图测IgG1等6个指标,B5孔没有样品(B1代替)

2、提供酶标仪照片

二、客户提供材料

血清样本分四组,每组五个血清样品,分别为

A1、A2、A3、A4、A5

B1、B2、B3、B4、B5

C1、C2、C3、C4、C5

D1、D2、D3、D4、D5

三、实验原理

间接法包被抗原板,加入待测样本/标曲,加入相对应的HRP偶联的二抗,形成抗原-抗体-二抗复合物;最后通过HRP催化底物显色,发生颜色反应,颜色的深浅代表抗原抗体反应强度

 

四、预实验实验设计

预包被板后,按照如下设计进行加样

小鼠抗卵清蛋白(OVA)IgG2a

小鼠抗卵清蛋白(OVA)IgG1

实验步骤:两步法

1)按设计图,在板上加入50µL标准品,37℃孵育30min;

2)洗板5次 ,再加入100µL检测抗体(HRP),37℃孵育30min;

2)洗板5次,加底物A、B各50µL,37度孵育15min;

3)加入50µL终止液,读数。

五、实验数据分析

1.预实验实验结果:

小鼠抗卵清蛋白(OVA)IgG2a

结论样本A2B3样本不显色,C4D510倍显色居中。

小鼠抗卵清蛋白(OVA)IgG1

结论0值正常,线性良好,A5不显色,B4还需继续稀释,C3和D2稀释1000倍显色居中。

 

2.正式实验结果:

小鼠抗卵清蛋白(OVA)IgG2a

结论样本A1,A2和B5没有样本量,样本C4,D1和D5显色居中,其余样本不显色。

小鼠抗卵清蛋白(OVA)IgG1

结论0值正常,线性良好,样本A1,A2和B5无样本量,样本A3,A5,B1-B4,C1,C3,C5,D1-D4显色居中。

 

从以上的测试验证可以看出,优品生物的抗体特异性、灵敏度、稳定性等指标有着非常优异的效果,品质不输大牌进口,处于行业领先地位。接下来来看看小鼠抗卵清蛋白IgG抗体(OVAIgGELISA试剂盒的实验数据。

试剂盒实验数据

试剂盒性能

1. 检测范围:0.25 ng/mL – 8 ng/mL。

2. 灵敏度:最低检测浓度小于0.09 ng/mL。

3. 特异性:不与其它可溶性结构类似物交叉反应。

4. 稳定性2-8℃保存,有效期6个月

 

标准曲线线性好

以所测标准品的OD值为横坐标,标准品的浓度值为纵坐标,用相关软件创建标准曲线方程,最佳方程式应依方程计算的R2值来定,将样品的OD值代入方程,计算出样品的浓度。

精密度好

板内精密度低浓度样本中浓度样本和高浓度样本分别在1块板子上检测20次。

板间精密度低浓度样本中浓度样本和高浓度样本分别在3块板子上检测20次。

可见优品生物试剂盒产品的板内和板间精密度均非常好 

回收率好

分别往不同样本中添加已知浓度的OVA IgE,做回收实验,得出回收率范围和平均回收率。可见优品生物试剂盒产品的回收率(准确度)好

稀释线性好

将添加有OVA IgE的样本分别稀释2倍,4倍,8倍,16倍做回收实验,得出回收率范围及平均回收率。可见优品生物试剂盒产品的稀释线性(稀释回收率)好



优品生物,在高质量循证医学研究的支持下,哮喘的诊断和治疗必定将不断完善,为更多哮喘患者带来获益。

以下是优品生物与卵清蛋白OVA有关的试剂盒产品: