2024-01-31
正确的样本保存方法至关重要，因为不当的保存手段可能导致样本退化或损坏。我们明白，在实验之前，如何妥善存储细胞、组织、植物和细菌等各种样本是许多客户面对的一大挑战和学习点。为此，我们将探讨并分享不同样本的处理与保存技巧，希望能为您提供有价值的指导。
细胞样本
1、 悬浮细胞
1） 把细胞及培养液一起收集到15ml或者50ml离心管中，1500rpm离心3min，弃去上清；
2） 加入PBS轻轻吹打，1500rpm离心3min，弃去上清；
3） 反复3次，弃去上清后于-80度或者液氮冻存待用。
2、 贴壁细胞
1） 胰酶消化：用胰酶将细胞消化后，收集到15ml或者50ml离心管中，1500rpm离心3min，弃去上清；
2） 加入PBS轻轻吹打，1500rpm离心3min，弃去上清；
3） 反复3次，弃去上清后于-80度或者液氮冻存待用。
3、 细胞刮子收集细胞
某些蛋白（即对胰酶比较敏感或者实验特殊要求，如E-Cadherin不易用胰酶消化后进行WB检测），直接用细胞刮子刮下细胞。
1） 将刮下的细胞收集到离心管中，1500rpm离心3min，弃去上清；
2） 加入PBS轻轻吹打，1500rpm离心3min，弃去上清；
3） 反复3次，弃去上清后于-80度或者液氮冻存待用。
动物组织样本
1）取下合适组织样品后用预冷的PBS或者生理盐水漂洗，尽量除尽残留血液，用滤纸把多余PBS吸取干净；
2）把组织分成约100mg大小（依据实验目的需要进行调整），用锡纸分别包装好或者用冻存管装好，于-80度或者液氮中保存。
植物样本
取得待测植物样品后，用蒸馏水把泥土漂洗干净，用滤纸把多余水分吸取干净，分装成合适大小于-80度或者液氮中保存。
细菌样本
1）细菌培养完成后，10000rpm离心5min收集细菌，加入PBS吹打，10000rpm离心5min，弃去上清；
2） 反复3次，弃去上清后于-80度或者液氮冻存待用。
提示：以上样本检测磷酸化蛋白，建议新鲜样本提取蛋白，提取后的蛋白加Loding buffer煮沸10min，如果短期内做可以-20度保存，长时间-80度保存。请在3个月内进行，长时间保存样品容易使磷酸化蛋白去磷酸化而检测不到磷酸化条带。
注意
1.提取胞浆、核蛋白应首选新鲜样本，以避免冻存效果对核蛋白含量的减少；
2.存放在-80°C或液氮中的样本应避免反复冻融，宜及早测试；
3.长途运输样品时应使用干冰或液氮保持低温。
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