高半胱氨酸(HCy)检测试剂盒 - 优品生物官网-ELISA科研检测中心

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高半胱氨酸(HCy)检测试剂盒

产品货号： YPJ1568

规格：

数量：

- +

价格：

￥3000.00

种属: 通用种属

检测范围: 500ng/mL-8,000ng/mL

灵敏度:

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用途

用于检测血清、血浆、细胞培养上清液等样本中高半胱氨酸(HCy)的浓度。

检验原理

试剂盒采用酶联免疫分析方法。采用生物素标记高半胱氨酸(HCy)，纯化的抗高半胱氨酸(HCy)抗体包被微孔板，在竞争抑制反应中，一定量的固相抗体与生物素标记高半胱氨酸(HCy)及非标记抗原（校准品或标本）进行抑制竞争反应，抗体与生物素标记的高半胱氨酸(HCy)结合量受非标记抗原量所抑制，非标记抗原量多,抗体与生物素标记的高半胱氨酸(HCy)结合就少，反之结合就多；反应平衡后，形成固相抗体-生物素化高半胱氨酸(HCy)，再加入酶标记的亲和素，形成固相抗体-生物素化高半胱氨酸(HCy)-酶标-亲合素复合物。经加底物显色后，用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值）。随着高半胱氨酸(HCy)浓度的升高，OD值逐渐下降呈良好的线性关系。本试剂盒具有灵敏度高、特异性强、重复性好、操作简单、快速等特点，对样本中高半胱氨酸(HCy)的减少或升高有可靠的检出性能。

特异性

本试剂盒识别天然和重组高半胱氨酸(HCy)，与结构类似物无交叉。

重复性

板内，板间变异系数均<10%。

典型数据

以下数据和曲线仅供参考，实验者需根据自己的实验建立标准曲线。每次检测，每块酶标板都必须设立标准曲线。详情数据见说明书！

精密度

批内精密度：三组已知的高、中、低浓度样品，进行二十次在同一个板块内精度评估。批间精密度：三组已知的高、中、低浓度样品，进行二十次在不同板块内精度评估。详情数据见说明书！

回收率

分别往不同样本中添加已知的高、中、低浓度目的蛋白样品，进行五次在同一个板块内回收率评估，回收率在85%-115%之间。详情数据见说明书！

试剂盒组成及保存

校准品:0.35ml/管 ,保存：2-8℃14天；
包被微孔板：96T/48T ，保存：2-8℃14天；
生物素化抗原：6mL ，保存：2-8℃180天；
HRP标记抗体：6mL ，保存：2-8℃14天；
样本稀释液：6mL ，保存：2-8℃180天；
底物液A：6mL ，保存：2-8℃180天；
底物液B：6mL ，保存：2-8℃180天；
终止液：6mL ，保存：2-8℃180天；
20×浓缩洗涤液：25mL ，保存：2-8℃180天；
说明书：1份；
自封袋：1个；
不干胶：4片。

试验所需自备物品

1.标准规格酶标仪。
2.自动洗板机。
3.振荡器。
4.系列可调节移液器及吸头，一次检测样品较多时，最好用多通道移液器。

操作步骤

推荐样本稀释方案：建议老师先做预实验摸索样本最佳稀释倍数，然后再做正式实验。所有试剂和组分都先恢复到室温，标准品、质控品和样品，建议做复孔。
1.将各种试剂移至室温平衡半小时，取浓缩洗涤液，根据当批检测数量，用蒸馏水1：20稀释，混匀后备用。
2.将预包被板从密封袋中取出，设一个空白对照孔，不加任何液体；每个校准品设2孔，每孔加入对应校准品50μl；其余每个检测孔直接加待测血清或质控品50μl。
3.除空白孔外所有孔加入生物素化抗原50μl，混匀，贴上封板膜，置37℃温育60分钟。
4.手工洗板：弃去孔内液体，洗涤液注满各孔，静置10秒甩干，重复3次后拍干。洗板机洗板：选择洗涤3次程序洗板后拍干。
5.每孔加入酶标亲合素50μl（空白对照孔除外），混匀，贴上封板膜，置37℃温育30分钟。
6.手工洗板：弃去孔内液体，洗涤液注满各孔，静置10秒甩干，重复3次后拍干。洗板机洗板：选择洗涤3次程序洗板后拍干。
7.每孔加显色剂A 50μl，显色剂B 50μl，振荡混匀后，置37℃避光显色15分钟，每孔加终止液50μl。
8.用酶标仪读数，取波长450nm，先用空白对照孔调零点，然后测定各孔光密度值（OD值）。

文献

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