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可替宁(Cot)检测试剂盒
产品货号: YPJ1813
规格:
  • 96T
  • 48T
数量:
- +
价格:
¥3000.00
种属: 通用种属
检测范围: 3125pg/mL-50,000pg/mL
灵敏度:
用途
用于检测血清、血浆、细胞培养上清液等样本中可替宁(Cot)的浓度。
检验原理
试剂盒采用酶联免疫分析方法。采用生物素标记可替宁(Cot),纯化的抗可替宁(Cot)抗体包被微孔板,在竞争抑制反应中,一定量的固相抗体与生物素标记可替宁(Cot)及非标记抗原(校准品或标本)进行抑制竞争反应,抗体与生物素标记的可替宁(Cot)结合量受非标记抗原量所抑制,非标记抗原量多,抗体与生物素标记的可替宁(Cot)结合就少,反之结合就多;反应平衡后,形成固相抗体-生物素化可替宁(Cot),再加入酶标记的亲和素,形成固相抗体-生物素化可替宁(Cot)-酶标-亲合素复合物。经加底物显色后,用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值)。随着可替宁(Cot)浓度的升高,OD值逐渐下降呈良好的线性关系。本试剂盒具有灵敏度高、特异性强、重复性好、操作简单、快速等特点,对样本中可替宁(Cot)的减少或升高有可靠的检出性能。
特异性
本试剂盒识别天然和重组可替宁(Cot),与结构类似物无交叉。
重复性
板内,板间变异系数均<10%。
典型数据
以下数据和曲线仅供参考,实验者需根据自己的实验建立标准曲线。每次检测,每块酶标板都必须设立标准曲线。详情数据见说明书!
精密度
批内精密度:三组已知的高、中、低浓度样品,进行二十次在同一个板块内精度评估。 批间精密度:三组已知的高、中、低浓度样品,进行二十次在不同板块内精度评估。 详情数据见说明书!
回收率
分别往不同样本中添加已知的高、中、低浓度目的蛋白样品,进行五次在同一个板块内回收率评估,回收率在85%-115%之间。 详情数据见说明书!
试剂盒组成及保存
校准品:0.35ml/管 ,保存:2-8℃14天;
包被微孔板:96T/48T ,保存:2-8℃14天;
生物素化抗原:6mL ,保存:2-8℃180天;
HRP标记抗体:6mL ,保存:2-8℃14天;
样本稀释液:6mL ,保存:2-8℃180天;
底物液A:6mL ,保存:2-8℃180天;
底物液B:6mL ,保存:2-8℃180天;
终止液:6mL ,保存:2-8℃180天;
20×浓缩洗涤液:25mL ,保存:2-8℃180天;
说明书:1份 ;
自封袋:1个 ;
不干胶:4片 。
试验所需自备物品
1.标准规格酶标仪。
2.自动洗板机。
3.振荡器。
4.系列可调节移液器及吸头,一次检测样品较多时,最好用多通道移液器。
操作步骤
推荐样本稀释方案:建议老师先做预实验摸索样本最佳稀释倍数,然后再做正式实验。 所有试剂和组分都先恢复到室温,标准品、质控品和样品,建议做复孔。
1.将各种试剂移至室温平衡半小时,取浓缩洗涤液,根据当批检测数量,用蒸馏水1:20稀释,混匀后备用。
2.将预包被板从密封袋中取出,设一个空白对照孔,不加任何液体;每个校准品设2孔,每孔加入对应校准品50μl;其余每个检测孔直接加待测血清或质控品50μl。
3.除空白孔外所有孔加入生物素化抗原50μl,混匀,贴上封板膜,置37℃温育60分钟。
4.手工洗板:弃去孔内液体,洗涤液注满各孔,静置10秒甩干,重复3次后拍干。洗板机洗板:选择洗涤3次程序洗板后拍干。
5.每孔加入酶标亲合素50μl(空白对照孔除外),混匀,贴上封板膜,置37℃温育30分钟。
6.手工洗板:弃去孔内液体,洗涤液注满各孔,静置10秒甩干,重复3次后拍干。洗板机洗板:选择洗涤3次程序洗板后拍干。
7.每孔加显色剂A 50μl,显色剂B 50μl,振荡混匀后,置37℃避光显色15分钟,每孔加终止液50μl。
8.用酶标仪读数,取波长450nm,先用空白对照孔调零点,然后测定各孔光密度值(OD值)。
文献
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ELISA样本处理试剂
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