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人白细胞介素17(IL-17)检测试剂盒
产品货号: SYP-H0679
规格:
  • 96T
  • 48T
数量:
- +
价格:
¥3000.00
种属: 人
检测范围: 125-2000pg/mL
灵敏度:
用途
用于检测血清、血浆、细胞培养上清液等样本中人白细胞介素17(IL-17)的浓度。
检验原理
本试剂盒采用双抗体夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。在预包被抗人白细胞介素17(IL-17)抗体(固相抗体)的微孔酶标板中,加入人白细胞介素17(IL-17)校准品和待测样本,再加入生物素标记抗体,经过温育与充分洗涤后,再加入HRP偶联的亲和素,经过温育与充分洗涤,去除未结合的组分,在微孔板固相表面形成固相抗体-抗原-生物素标记抗体-亲和素酶的夹心复合物。加TMB显色液,产生蓝色产物,在终止液作用下,最终转化为黄色,在酶标仪450nm波长上测定吸光度(OD值),吸光度(OD值)与待测样品中人白细胞介素17(IL-17)的浓度正相关。拟合校准品曲线,可以计算出样本中人白细胞介素17(IL-17)的浓度。
特异性
本试剂盒识别天然和重组人白细胞介素17(IL-17),与结构类似物无交叉。
重复性
板内,板间变异系数均<10%。
典型数据
以下数据和曲线仅供参考,实验者需根据自己的实验建立标准曲线。每次检测,每块酶标板都必须设立标准曲线。详情数据见说明书!
精密度
批内精密度:三组已知的高、中、低浓度样品,进行二十次在同一个板块内精度评估。
批间精密度:三组已知的高、中、低浓度样品,进行二十次在不同板块内精度评估。
详情数据见说明书!
回收率
分别往不同样本中添加已知的高、中、低浓度目的蛋白样品,进行五次在同一个板块内回收率评估,回收率在85%-115%之间。 详情数据见说明书!
线性
试剂盒组成及保存
校准品:2 vial;保存:2-8℃
校准品复溶液:2 vial;保存:2-8℃
校准品&样本稀释液:25mL;保存:2-8℃
包被微孔板:96T/48T;保存:2-8℃
生物素抗体:10mL;保存:2-8℃
HRP标记亲和素:10mL;保存:2-8℃
TMB显色液:10mL;保存:2-8℃
终止液:6mL;保存:2-8℃
20×浓缩洗涤液:25mL;保存:2-8℃
说明书 1份
自封袋 1个
不干胶 4片
试验所需自备物品
1.标准规格酶标仪。
2.自动洗板机。
3.振荡器。
4.系列可调节移液器及吸头,一次检测样品较多时,最好用多通道移液器。
操作步骤
所有试剂和组分都先恢复到室温,校准品、质控品和样品,建议做复孔。
1、按前面说明书描述的方法,配制好试剂盒各种组分的工作液。
2、从铝箔袋中取出所需板条,剩余的板条用自封袋密封放回冰箱。
3、设置校准品孔、样本稀释液孔、空白孔和样本孔,校准品孔各加不同浓度的校准品50μL,样本稀释液孔加样本稀释液50μL,空白孔不加,样本孔加待测样本50μL。除空白孔外,每孔加入生物素抗体100uL,用封板膜盖住反应板,37℃水浴锅或恒温箱避光温育60min。
4、揭开封板膜,弃去液体,吸水纸上拍干,每孔加满洗涤液,静置1min,甩去洗涤液,吸水纸上拍干,如此重复5次。若使用自动洗板机,请按洗板机操作程序进行洗板,添加浸泡30s的程序,可以提高检测的精度。洗板结束,加底物前,要在干净不掉屑的纸上,充分拍干反应板。
5、除空白孔外,每孔加入HRP标记亲和素100uL,用封板膜盖住反应板,37℃水浴锅或恒温箱避光温育20min。
6、重复步骤4。
7、所有孔中加入TMB显色液100μL。用封板膜盖住反应板,37℃水浴锅或恒温箱避光温育15min。
8、所有孔加入终止液50μL,在450nm波长酶标仪上读取各孔吸光度(OD值)。
文献
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ELISA样本处理试剂
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